La méthode consiste à inoculer 5 tubes contenant chacun un milieu sélectif pour E. coli avec l'échantillon à tester, puis d'incuber les tubes à différentes températures pour permettre la croissance des bactéries. Ensuite, les tubes sont examinés pour détecter la présence de bactéries caractéristiques d'E. coli. Si au moins un des tubes est positif, on peut estimer le nombre de bactéries dans l'échantillon à partir d'un tableau de résultats basé sur la probabilité statistique. Une confirmation de l'identification d'E. coli est ensuite réalisée à l'aide de tests biochimiques.
